-
کیت رنگ آمیزی گلیکوپروتئین بایومیکس یک کیت رنگ سنجی راحت، سریع و حساس برای رنگ آمیزی پروتئین های گلیکوزیله در ژل های پلی آکریل آمید یا غشاهای نیتروسلولز با استفاده از روش اسید پریودیک شیف (PAS) است. این کیت سه معرف ضروری و یک پروتکل کامل برای رنگ آمیزی اختصاصی پروتئین های گلیکوزیله (گلیکوپروتئین ها) که توسط الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید (PAGE) جدا شده اند، ارائه می دهد. ژل یا غشای حاوی پروتئین های جدا شده با محلول پریودات تیمار می شود که گروه های قند سیس-دیول را در گلیکوپروتئین ها اکسید می کند. گروه های آلدئیدی حاصل از طریق تشکیل پیوندهای شیف-باز با یک معرف که نوارهای سرخابی تولید می کند، شناسایی می شوند. این روش رنگ‌آمیزی که به‌طور سنتی روش معرف اسید پریودیک شیف (PAS) نامیده می‌شود. -
کیت رنگ آمیزی نقره ای بایومیکس یک سیستم رنگ آمیزی سریع، فوق العاده حساس برای تشخیص پروتئین در ژل های پلی آکریل آمید است که نتایج ثابت و قابل اعتمادی را به همراه دارد. این یک روش رنگ آمیزی پروتئین با استفاده از فلز نقره (Ag) است که پس‌زمینه ژل شفاف و یکنواختی را ایجاد می‌کند. در مینی ژل های استاندارد، پروتئین ها در بیشتر از 0.25 نانوگرم در هر باند یا نقطه قابل تشخیص هستند.
-
رنگ آمیزی ژل SDS-PAGE یکی از روشهای رایج در آزمایشگاههای پروتئومیکس برای قابل مشاهده کردن پروتئین جداشده در فرایند الکتروفورز است. برای این منظور روشهای مختلفی برای رنگ آمیزی پروتئین به کار گرفته می شود. روش کوماسی بلو از جمله روشهای رایج و ارزان در این خصوص است. منتهی استفاده از رنگ کوماسی بلو معمولی می تواند سبب ایجاد رنگ زمینه زیاد شود که با رنگبری نیز مقداری از رنگ باقی مانده و سبب جلوگیری از وضوح در پروتئینهای رنگ شده می گردد. برای افزایش وضوح در مشاهده پروتئینهای رنگ آمیزی شده، استفاده از کیت رنگ آمیزی کوماسی با پس زمینه روشن توصیه می گردد. همچنین استفاده از این کیت برای مشاهده پروتئینهایی که با مقدار کم در سلول بیان می شوند انتخاب خوبی است. -
رنگ آمیزی ژل SDS-PAGE یکی از روشهای رایج در آزمایشگاههای پروتئومیکس برای قابل مشاهده کردن پروتئین جداشده در فرایند الکتروفورز است. برای این منظور روشهای مختلفی برای رنگ آمیزی پروتئین به کار گرفته می شود. روش کوماسی بلو از جمله روشهای رایج و ارزان در این خصوص است.
-
آنتی بادیهای مونوکلونال از جمله ابزارهای پرکاربرد در بیولوژی و پزشکی هستند. آنتی بادیها پروتئینهای ترشحی هستند که پس از تولید در سلول (مثلا هیبریدوما) در محیط کشت ترشح می شوند. برای خالص سازی آنتی بادیها از محیط کشت می توان از کیت استخراج آنتی بادی بایومیکس استفاده کرد. این کیت بر مبنای رسوب دهی آنتی بادی و سپس خالص سازی آن بر روی ستون افینیتی کار می کند. کیت حاوی تمام ترکیبات لازم برای خالص سازی به جز ستون افینیتی می باشد. -
کیت اندازه گیری غلظت پروتئین به روش BCA یک روش ساده، سریع و مقاوم در برابر شوینده (تا 5٪) برای تعیین غلظت پروتئین ها در محلول را ارائه می دهد. این روش از نمک مس (Cu2+) استفاده می کند که می تواند توسط پروتئین (ها) به حالت مسی کاهش یابد. یون مس تولید شده با معرف اسید بیسینکونیک با یک نوار جذب بسیار قوی در مرکز ۵۶۲ نانومتر، یک کمپلکس رنگی شدید تشکیل می دهد. شدت کمپلکس آبی با مقدار پروتئین موجود در نمونه متناسب است. آزمایش BCA Protein Assay برای اندازه گیری غلظت پروتئین در محدوده 0.5-30 میکروگرم پروتئین (0.01-0.6 mg/ml) مناسب است. -
اگزوزومها وزیکولهای 30-120 نانومتری هستند که از سلول رها می شوند. این ذرات می توانند حاوی انواع بیومولکولهای پیام رسان باشند که بر روی فعالیت و عملکرد سلولها و بافت مجاور تاثیرگزار خواهند بود. کیت خالص سازی اگزوزوم بایومیکس بر مبنای رسوب دهی اگزوزومها بوده و بدون نیاز به اولتراسانتریفوز و تنها با استفاده از یک میکرو سانتریفوژ رومیزی قادر به خالص سازی اگزوزومها با درجه خلوص بالا خواهید بود. -
MTT (سنجش رنگ تترازولیوم) یک روش رنگ سنجی برای ارزیابی فعالیت متابولیک سلولی است. آنزیم های اکسیدوردوکتاز سلولی وابسته به NAD(P)H ممکن است، تحت شرایط تعریف شده، تعداد سلول های زنده موجود را منعکس کنند. این آنزیم ها قادرند رنگ تترازولیوم MTT را که از نظر شیمیایی 3-(4،5-دی متیل تیازول-2-ایل)-2،5-دی فنیل تترازولیوم برومیداست، به فرمازان نامحلول که رنگ بنفش دارد، کاهش دهند. سنجش رنگ تترازولیوم همچنین می تواند برای اندازه گیری سمیت سلولی (از دست دادن سلول های زنده) یا فعالیت سیتواستاتیک (تغییر از تکثیر به سکون)عوامل دارویی بالقوه و مواد سمی مورد استفاده قرار گیرد. سنجش MTT معمولا در تاریکی انجام می شود زیرا معرف MTT به نور حساس است. -
این کیت در فرمتهای متعدد در شرکت بایومیکس تولید می گردد. بسته به درخواست مشتری و هدفی که از آزمایش استخراج پروتئین دارد ممکن است درخواستها متفاوت باشد. برای مثال کیتهای بایومیکس میتوانند برای استخراج پروتئین از منابع حیوانی، گیاهی، باکتریها، مخمر و بافت و سلول باشد. یا بنا بر هدف آزمایشات برای مطالعه فسفریلاسیون یا بیان پروتئینها مورد استفاده واقع شوند. همچنین آزمایشات بعدی بر روی نمونه های پروتئینی می تواند فرمولاسیون کیت را تحت تاثیر قرار دهند. برای کسب اطلاعات بیشتر با مشاوران بایومیکس در تماس باشید. -
الکتروفورز یک روش رایج در جداسازی بیومولکولها بر اساس بار الکتریکی و وزن مولکولی است. برای جداسازی مولکولهای پروتئینی و اسیدهای نوکلئیک می توان از روش SDS-PAGE استفاده کرد. در این روش SDS سبب پوشش حداکثری مولکولها با بار منفی می گردد. فلذا اساس جداسازی در این روش بر مبنای وزن مولکولی خواهد بود. در این روش مولکولهای اکریل آمید در یک فرایند شیمیائی به یکدیگر متصل شده و ماتریکس ژلی پلی اکریل آمید تشکیل می شود. درصد وزنی مولکولهای اکریل آمید تعیین کننده میزان خلل و فرج ژل می باشد که هر چه بیشتر باشد امکان عبور به مولکولهای کوچکتر را خواهد داد. در SDS-PAGE پروتئینها، معمولا از ژل 12 درصد برای قدم اول استفاده می شود. اما ممکن است بر حسب وزن مولکولی مورد نظر نیاز به درصدهای دیگر ژل باشد.
